
一般推薦MO+CRISPRi兩種策略去同時(shí)敲降一個(gè)基因,由于MO是在轉錄后水平上敲降基因的功能,而CRISPRi是在轉錄水平上敲降基因的功能,使用兩種獨立的、原理完全不同的敲降方法,如果給出的敲降效果(表型)是一樣的,那么這樣建立的敲降方法可以被認可是有效且特異的。請大家注意:評價(jià)基因敲降效果需要從有效和特異兩個(gè)方面來(lái)考慮。有效性問(wèn)題:CRISPRi敲降的有效性可以通過(guò)RT-PCR法檢測目標基因表
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以基因編輯Crispr/Cas9工具構建斑馬魚(yú)敲除/敲入模型
Crispr/Cas9技術(shù)簡(jiǎn)單、高效,且沒(méi)有物種限制,現已廣泛應用于人、大小鼠、斑馬魚(yú)、果蠅、豬、羊、水稻、小麥等動(dòng)植物,為動(dòng)植物品種改良、疾病模型建立以及基因治療等不同領(lǐng)域開(kāi)展基礎研究與應用研究的遺傳工程利器。
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